流式细胞仪检测细胞增殖:细胞增殖检测的三种方法

细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础,是生物体的重要生命特征 。检测细胞在培养基或组织中的生长速率,对于细胞生长和分化研究至关重要 。在药物开发过程中也常被用于评估药物的毒性和对癌细胞生长的抑制情况 。细胞增殖检测通常是基于DNA含量或细胞代谢实现的,主要的研究方向为对活细胞的代谢活性的检测(基于CCK-8、WST、XTT、MTT等)及对DNA合成的检测(基于BrdU、 EdU) , 可通过体内成像、微孔板或流式细胞术检测等多种技术进行细胞示踪 。

流式细胞仪检测细胞增殖:细胞增殖检测的三种方法

文章插图
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细胞增殖检测常见的三种方法:
1、使用四唑盐进行代谢活性检测
通过添加四咪唑盐到细胞中可进行线粒体内酶代谢活性的测定 。活细胞能将四咪唑盐(如CCK-8、MTT、XTT、WST-1)还原成有色的甲瓒或甲瓒盐(Formazan) , 可通过分光光度计或酶标仪进行检测 。
2、测定ATP水平检测细胞增殖
活细胞需要不断以ATP的形式输入自由能,因此通过检测ATP的增加水平可检测细胞增殖 。
3、DNA的合成的检测
DNA的新组装合成是细胞生长的必要条件,故经常被用来进行细胞增殖、细胞活力及凋亡的检测 。BrdU及EdU , 都是胸腺嘧啶的非放射性类似物,能掺入增殖细胞的DNA中,可通过对BrdU及EdU的检测,从而对DNA的合成量进行测定 。
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【流式细胞仪检测细胞增殖:细胞增殖检测的三种方法】


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